L'objectif principal de cette plateforme est de fournir une expertise et un soutien dans le domaine de la neurobiologie moléculaire, cellulaire et tissulaire. GenCyTi fournit un support dans la conception d'expériences et propose des outils, des équipements et des installations. Cette plateforme propose des formations, de l'aide et des conseils aux utilisateurs.
Biologie moléculaire :génération d'outils moléculaires et cellulaires "à façon", clonage, qPCR, préparation d'ADN génomique et plasmidique, construction de mutagenèse par CRISPR....
Biologie cellulaire : production virale (Lentivirus, rétrovirus, AAVs recombinants), transfection transitoire, production de lignées cellulaires stables monoclonales ou polyclonales (virus), culture primaire, analyse par cytométrie en flux, immuno-phénotypage
Biologie tissulaire : Immunohistochimie/ Immunofluorescence, microscopie photonique (fluorescence et microscope confocal), clarification des tissus
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Organigramme
La plateforme GenCyTi est composée de 4 entités qui permet des explorations à l'échelle moléculaire, cellulaire et tissulaire :
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NeuroGénétique FOnctionnel (NGFO)
Responsable plateau : Claire Benetollo
NGFO permet aux membres du CRNL ayant des compétences limitées en biologie moléculaire d'envisager des expériences de biologie cellulaire, d'optogénétique, de pharmacogénétique ou de tract-tracing utilisant des mutants, des transgènes ou des vecteurs viraux adaptés à leurs besoins spécifiques. Le plateau collabore également avec d'autres laboratoires locaux (Lyos, Melis, LabTau,...) et souhaite élargir ses collaborations avec d'autres laboratoires extérieurs pour générer des outils déjà existants ou innovants.
- Bio-ingénierie moléculaire et cellulaire :
- Création de vecteurs viraux recombinants : AAVs, Lentivirus et Rétrovirus :
- Etablissement de lignées stables polyclonales ou monoclonales :
- Production de protéines "taggées" :
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Culture Cellulaire et Immunophénotypage (CLIP)
Responsable plateau : Anne Ruiz
CLIP accompagne des groupes de recherche dans leurs projets utilisant la culture primaire et l'immunophénotypage, en apportant un accompagnement dans le design expérimental, le développement de panel de phénotypage multicolore (cytomètre en flux CANTO II, 3 lasers), une assistance de la préparation des cellules à l'analyse des données.
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Imagerie et Histochimie (IMAGHIS)
Responsable plateau : Sandrine Blondel
Systèmes d'imagerie accessibles au CRNL et sous la responsabilité du plateau IMAGHIS:
-un microscopes à fluorescence (Zeiss Axio ImagerM2)
-un macroscope à fluorescence (Zeiss Axio zoom.v16)
-un microscope confocal à balayage laser Zeiss LSM800 équipé de la technologie AiryScan.
Le plateau dispense des formations sur ces différents équipements et fournit des conseils aux utilisateurs sur l'optimisation de l'acquisition d'images.
IMAGHIS accompagne le personnel dans la mise au point et la réalisation de techniques d'histologie et d'immunohistologie.
Le plateau met au point et développe des protocoles de clarification des tissus pour une imagerie en profondeur.
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Un projet ? Une idée ? Une question ? N’hésitez pas à nous contacter à l’adresse suivante : gencyti@listes.crnl.fr